آماده سازی، معیارهای کیفیت و خواص مکمل های عصاره پلاکت خون انسان برای تکثیرسلول های بنیادی درشرایط ازمایشگاهی

اکثر کاربردهای بالینی سلولهای استرومایی مزانشیمی چندتوان انسان (MSCs) برای سلول درمانی، مهندسی بافت، پزشکی ترمیمی و درمان بیماری های ایمنی و التهابی نیاز به یک مرحله جداسازی و تکثیر در شرایط ازمایشگاهی دارد تا به تعداد معنی داری سلول از نظربالینی برسد. شرایط  مورد استفاده برای جداسازی و تکثیرسلول باید کیفیت و ایمنی را تامین کند. این امر به ویژه برای محیط رشد مورد استفاده برای جداسازی و تکثیرسلولهای بنیادی مزانشیمی صحیح است. محیط های رشد پایه مورد استفاده برای تکثیرسلولهای بنیادی مزانشیمی با چندین ماده مغذی و عوامل رشد مکمل شده است. مدت طولانی است که سرم جنین گاوی (FBS) به عنوان مکمل محیط کشت استاندارد ​​برای کشت سلولهای بنیادی مزانشیمی درمقیاس آزمایشگاهی پذیرفته شده است. با این حال، ترکیب FBS به میزان کمی تعیین ویژگی شده و به عنوان منبعی از آنتی ژن های زنوژنیک و عفونت های مشترک انسان و دام دارای عوامل خطراست.  بنابراین FBS به عنوان یک مکمل محیط رشد برای جداسازی وتکثیر سلول های بنیادی مزانشیمی برای پروتکل های درمانی انسان مناسب نیست. در سال های اخیر، مواد خون انسانی، و به ویژه عصاره ها و فاکتورهای کنسانتره پلاکتی به عنوان مکمل محیطی ​​کارآمد برای جداسازی و تکثیر سلول های بنیادی مزانشیمی از منابع مختلف پدید آمده است. این مقاله به تجزیه و تحلیل مزایا و محدودیت های استفاده از مواد پلاکت انسانی به عنوان مکمل محیط کشت برای جداسازی و تکثیر MSC می پردازد. ما شیوه های تولید کنسانتره پلاکتی اتولوگ و آلوژن ، اقدامات انجام شده برای اطمینان از پروفایل ایمنی مطلوب بیماری زایی ، و روش های آماده سازی پلاکت برای تکثیر MSC را ارائه می کنیم. ما همچنین تهیه چنین فراورد های خونی را مورد بحث قرار می دهیم. مواد پلاکت انسانی در شرایط مطلوب تولید استاندارد و ایمن، می تواند درآینده مکملی استاندارد برای تولید سلول های بنیادی مزانشیمی در شرایط ازمایشگاهی برای پزشکی ترجمه و کاربردهای سلول درمانی باشد.

N Biotechnol. 2014 Jun 11. pii: S1871-6784(14)00672-4. doi: 10.1016/j.nbt.2014.06.001. [Epub ahead of print]

Preparation, quality criteria, and properties of human blood platelet lysate supplements for ex vivo stem cell expansion.

Shih DT¹, Burnouf T².

AAbstract

Most clinical applications of human multipotent mesenchymal stromal cells (MSCs) for cell therapy, tissue engineering, regenerative medicine, and treatment of immune and inflammatory diseases require a phase of isolation and ex vivo expansion allowing a clinically meaningful cell number to be reached. Conditions used for cell isolation and expansion should meet strict quality and safety requirements. This is particularly true for the growth medium used for MSC isolation and expansion. Basal growth media used for MSC expansion are supplemented with multiple nutrients and growth factors. Fetal bovine serum (FBS) has long been the gold standard medium supplement for laboratory-scale MSC culture. However, FBS has a poorly characterized composition and poses risk factors, as it may be a source of xenogenic antigens and zoonotic infections. FBS has therefore become undesirable as a growth medium supplement for isolating and expanding MSCs for human therapy protocols. In recent years, human blood materials, and most particularly lysates and releasates of platelet concentrates have emerged as efficient medium supplements for isolating and expanding MSCs from various origins. This review analyzes the advantages and limits of using human platelet materials as medium supplements for MSC isolation and expansion. We present the modes of production of allogeneic and autologous platelet concentrates, measures taken to ensure optimal pathogen safety profiles, and methods of preparing PLs for MSC expansion. We also discuss the supply of such blood preparations. Produced under optimal conditions of standardization and safety, human platelet materials can become the future "gold standard" supplement for ex vivo production of MSCs for translational medicine and cell therapy applications.

PMID: 24929129